Autor(a): Rogério Luiz Aires Lima
Orientador(a): Prof. Dr. Rodrigo Augusto da Silva
Data da defesa: 30/01/2024
Resumo: Introdução. A criptococose é uma doença causada pelo criptococos que atingem o pulmão pela inalação dos esporos e têm predileção pelo sistema nervoso central, como forma extra pulmonar. Trata-se de doença grave, que atinge principalmente imunodeprimidos (C. neoformans), mas existe uma forma que atinge os imunocompetentes (C. gattii). A galectina-3 é uma proteína que está no citoplasma, núcleo e espaço extracelular e modula a imunidade inata e adaptativa do hospedeiro e está relacionado à defesa do organismo contra o patógeno. Se a galectina-3 está aumentada, a defesa do organismo consegue eliminar a infecção, mas em situação de imunossupressão, os indivíduos ficam mais susceptíveis ao processo infeccioso, exibindo comportamento doentio. Objetivo. Correlacionar as alterações comportamentais com a alta carga e baixa carga fúngica e com a quantidade de galectina cerebral e pulmonar, juntamente com o marcador astrocitário GFAP e imunomarcação microglial com iba-1, além de avaliar a epigenética associada à Neurocriptococose. Material e métodos. Após um período de adaptação, realizou-se estudos de desenvolvimento e dividiu- se os indivíduos em 7 grupos, sendo: sham, controle, ciclofosfamida, ciclofosfamida e C. gattii, Ciclofosfamida e C. neoformans, C. neoformans e C. gattii. Após dois períodos, um de 7 dias e outro de 14 dias, realizou-se um teste de comportamento, eutanasiou-se os camundongos e foram analisados carga fúngica, histologia e microbiologia, galectina-3, proteína acida fibrilar glial. Resultados: os animais com alta carga e infectados com C. gattii tiveram maior alteração comportamental quando comparados com os outros grupos da pesquisa. Conclusão: Os animais com maior carga fúngica e menor Gal-3 encefálica tiveram maior comprometimento dos testes comportamentais. Independente da carga fúngica (alta ou baixa) houve reatividade glial. Naqueles infectados com C. gattii (imunossuprimidos ou imunocompetentes) tiveram maior comprometimento pulmonar e comportamento doentio exacerbado.
Palavras-chave: Criptococos, estudo comportamental, C. gattii, C. neoformans.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Autor(a): Loren da Silva Medeiros
Orientador(a): Profa. Dra. Maria Martha Bernatdi
Data da defesa: 27/05/2024
Resumo: O camundongo mutante recessivo bate-palmas BALB/c bapa apresenta mutação no gene Km2d. Em humanos a mutação deste gene está ligada à ocorrência da síndrome de Kabuki. Pacientes com esta síndrome apresentam hiperatividade e impulsividade com sintomas similares ao transtorno de déficit de atenção. Além disso, estudos prévios que caracterizaram o fenótipo deste mutante revelaram, além de outros aspectos, que eles apresentam aumento da atividade geral. Objetivos: Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar se o camundongo bapa apresenta comportamentos compatíveis com hiperatividade, déficit de atenção e impulsividade. Material e Métodos: Foram observados: a atividade geral em campo aberto, comportamentos de autolimpeza, no labirinto em Y, no teste de atenção baseado em objetos, no teste de esquiva de altura de camundongos BALB/c (grupo selvagem-WT) e bapa, machos e fêmeas. A expressão dos receptores da adenosina (ADORA 1 e 2) foi avaliada. Resultados: Em relação aos camundongos WT, os camundongos bapa machos apresentaram: aumento da atividade geral e da limpeza; redução na porcentagem de alternâncias em labirinto em Y e no teste de atenção a objetos, sem modificações no teste de impulsividade e aumento na expressão do receptor ADORA 2. As fêmeas bapa mostraram: redução na atividade geral e na limpeza; aumento nas frequências de alternâncias em labirinto em Y e no teste de atenção a objetos novos, com ausência de comportamento de risco e redução na expressão do receptor ADORA 2. Conclusões: Estes resultados sugerem que a mutação do gene Km2d afetou de forma diferente o comportamento de camundongos machos e fêmeas mutantes, provavelmente por alterações epigenéticas ligadas aos hormônios sexuais.
Palavras-chave: Mutação; N-ethyl-N-nitrosourea; comportamento; epigenética;hiperatividade.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Neuropsicofarmacologia Experimental e Ambiental.
Autor(a): Andréia Adelaide Gordinho Pinto
Orientador(a): Profa. Dra. Leoni Villano Bonamin
Data da defesa: 11/06/2024
Resumo: Introdução: Nesse estudo, a Artemia franciscana e o isoterápico de cloreto de sódio foram utilizados como modelos experimentais para avaliação da bio-resiliência de embriões ao stress hiposmótico, com enfoque para a possibilidade de rastreamento do isoterápico na água e a expressão de genes para proteínas de choque térmico (HSPs) como marcadores moleculares. Objetivo: Estudar os mecanismos de biorresiliência de Artemia franciscana ao stress hiposmótico após tratamento com cloreto de sódio (NaCl) 30CH e identificar sua presença na água pelo método de corantes solvatocrômicos. Métodos: Os experimentos foram realizados nas fases da lua cheia e minguante em cego. Utilizadas placas de cultura de 96 poços para observar a eclosão de cistos de Artemia franciscana, imersos em água pura ou água do mar artificial. Em estudo piloto foi feita a padronização do stress hiposmótico e a escolha da potência de NaCl entre 6CH e 200CH. Os controles foram água, água sucussionada, etanol 10% e etanol 10% sucussionado. Cistos expostos à água pura e tratados ou não com NaCl 30CH foram avaliados quanto à taxa de eclosão, vitalidade dos náuplios e expressão de genes-alvo para HSPs. Foi realizado um screening de 6 corantes solvatocrômicos para a seleção de um marcador físico-químico capaz de identificar a presença de NaCl 30CH na água. Dados analisados por ANOVA de duas vias, seguida de Tukey, sendo α<0,05. Resultados: O tratamento dos cistos com NaCl 30CH facilitou a interrupção da eclosão no estágio guarda-chuva e a expressão reduzida dos genes hsp26 e hsp90. Os corantes BDN e Coumarin 7 mostraram ser bons marcadores físico-químicos para o rastreamento do NaCl 30CH e Coumarin 7 foi escolhido para sua identificação na água. Discussão: O fato de os cistos permanecerem em estágio "guarda-chuva" em maior proporção e a menor expressão de p26 e hsp90 após o tratamento com NaCl 30CH sugere facilitação dos processos de interrupção do ciclo de vida dos animais expostos a condições ambientais incompatíveis com a espécie (stress hiposmótico severo), com possível impacto para toda a cadeia trófica em situações de vida real. O NaCl 30CH foi possível de ser rastreado na água pelo corante Coumarin 7. Conclusão: Houve facilitação da interrupção do desenvolvimento embrionário pelo NaCl 30CH em situações de alto risco para a espécie, sendo tal potência homeopática rastreável na água por corantes solvatocrômicos.
Palavras-chave: homeopatia, diapausa, camarão das salmouras, ecotoxicologia, corantes solvatocrômicos.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Autor(a): Alex de Camargo Coque
Orientador(a): Prof Dr. Rodrigo Augusto Foganholi da Silva
Data da defesa: 13/12/2024
Resumo: A criptococose é uma infecção fúngica oportunista causada pelas espécies Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, com elevada mortalidade em pacientes imunocomprometidos e imunocompetentes. Apesar de importantes avanços terem sido alcançados sobre sua fisiopatologia, ainda pouco sabemos a respeito dos mecanismos moleculares que envolvem o metabolismo da BH4 durante a evolução da criptococose. Utilizando um modelo de criptococose induzida em camundongos C57BL/6 imunossuprimidos ou não pela infecção nasofaríngea das cepas pela C. neoformans e C. gattii, a caracterização da evolução clínica da criptococose foi avaliada por testes comportamentais, histopatológicos e microbiológicos. Assim como a qPCR para determinação da expressão dos genes do metabolismo da BH4 nos tecidos pulmonar e encefálico. Os resultados obtidos neste estudo revelaram que a infecção pelos microrganismos promoveu comprometimento do peso corporal, o comportamento tipo doentio, acompanhado de gliose de forma tempo dependente. Em relação a expressão gênica, foi possível observar que a infecção modulou de forma distinta a expressão dos genes nos tecidos pulmonar e encefálico sem interferência do estado imunológico, sendo tecido pulmonar o tecido mais sensível ao tempo de infecção. Assim, nossos resultados mostram que a evolução da criptococose está diretamente relacionado ao comportamento doentio e gliose, além de modular genes-chave da via de síntese da BH4 de forma distinta entre os tecidos pulmonar e encefálico, sendo o tecido pulmonar o mais impactado.
Palavras-chave: C. neoformans, C. gattii, criptococose, BH4.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional
Autor(a): Lara Loureiro Weizel Chiminazzo
Orientador(a): Prof. Dr. Thiago Berti Kirsten
Data da defesa: 19/12/2024
Resumo: A pandemia em decorrência do novo coronavírus (SARS-CoV-2, causador da Coronavirus Disease 2019, ou COVID-19) infectou milhões de pessoas e causou mais de 6,8 milhões de mortes pelo mundo. Nossos estudos prévios avaliaram aspectos psicomotores e neurofuncionais após a COVID-19. Os resultados demonstram prejuízos nos testes de Praxia Fina, de Equilibração, de Memória, de Fluência Verbal, do Relógio e de Sincinesia, sempre comparado aos dados do grupo controle. Esses resultados foram mais surpreendentes ao levar em consideração que a maioria dos participantes não relatou doença pré-existente e não necessitou de internação hospitalar. O presente estudo deu continuidade ao projeto, com 60 indivíduos. O objetivo foi de acompanhar e reavaliar esses indivíduos três e seis meses após a primeira avaliação, a fim de verificar se as sequelas psicomotoras e neurofuncionais eram transitórias ou persistiram. Também foi objetivo aprofundar o conhecimento, correlacionando os prejuízos e sequelas com as diferentes variáveis (como a idade, sintomas prévios, tipo sanguíneo, etc.). Os resultados demonstraram que parte dos prejuízos psicomotores e neurofuncionais encontrados na primeira avaliação persistiram após três e seis meses: Testes Psicomotores e de Sincinesia. Os Testes de Memória e de Fluência Verbal apresentaram prejuízos até três meses após a primeira avaliação e o Teste do Relógio apresentou prejuízo somente na primeira avaliação. Além disso, as diferentes faixas etárias apresentaram resultados diferentes: os prejuízos pós-COVID-19 nos Testes Psicomotores foram mais marcantes e mais duradouros na faixa etária de 31-45 anos; e indivíduos de 18-30 anos apresentaram prejuízos de memória mais marcantes. Foi demonstrada correlação negativa entre o desempenho psicomotor e dor no corpo, coriza e dor de garganta durante a COVID-19, considerados, portanto, sintomas-chave. Porém, o teste de correlação não apontou qualquer relação entre o nível de cuidados médicos durante o curso da COVID-19 e o desempenho psicomotor. Por fim, o fator Rh foi determinante para o desempenho psicomotor: Rh- resultou em pior desempenho no Teste do Relógio. Concluindo, diversos prejuízos psicomotores e neurofuncionais foram observados mesmo seis meses após a cura da COVID-19, sendo os jovens, com menos de 46 anos, os especialmente afetados. Além disso, dor no corpo, coriza, e dor de garganta foram destacados como sintomas-chave e o fator Rh- para uma maior atenção e acompanhamento pós-COVID-19.
Palavras-chave: SARS-CoV-2; Psicomotricidade; Coronavírus; Pandemia; Distúrbios neurológicos.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Neuropsicofarmacologia Experimental e Ambiental.
